A szintetikus peszticidek széles körben elterjedt használata számos problémához vezetett, beleértve a rezisztens organizmusok megjelenését, a környezet leromlását és az emberi egészség károsodását.Ezért új mikrobiálisrovarirtóksürgősen szükség van az emberi egészségre és a környezetre nézve biztonságos megoldásokra.Ebben a vizsgálatban az Enterobacter cloacae SJ2 által termelt ramnolipid biofelületaktív anyagot használtuk a szúnyogok (Culex quinquefasciatus) és termeszek (Odontotermes obesus) lárváival szembeni toxicitás értékelésére.Az eredmények azt mutatták, hogy dózisfüggő halálozási arány volt a kezelések között.A termeszek és szúnyoglárvák biosurfaktánsainak LC50-értékét (50%-os halálos koncentráció) 48 órán belül nemlineáris regressziós görbe illesztési módszerrel határoztuk meg.Az eredmények azt mutatták, hogy a biofelületaktív anyag lárvicid és termeszellenes aktivitásának 48 órás LC50 értéke (95%-os konfidencia intervallum) rendre 26,49 mg/l (25,40-27,57 tartomány), illetve 33,43 mg/l (31,09-35,68 tartomány).A kórszövettani vizsgálat szerint a biosurfaktáns kezelés súlyosan károsította a lárvák és termeszek organellumszöveteit.A tanulmány eredményei azt mutatják, hogy az Enterobacter cloacae SJ2 által termelt mikrobiális biosurfaktáns kiváló és potenciálisan hatékony eszköz a Cx szabályozására.quinquefasciatus és O. obesus.
A trópusi országokban nagyszámú szúnyogok által terjesztett betegség tapasztalható1.A szúnyogok által terjesztett betegségek jelentősége széles körben elterjedt.Évente több mint 400 000 ember hal meg maláriában, és néhány nagyvárosban olyan súlyos betegségek járványai vannak, mint a dengue-láz, a sárgaláz, a chikungunya és a Zika.2 A vektorok által terjesztett betegségek minden hatodik fertőzéshez kapcsolódnak világszerte, és a legtöbbet a szúnyogok okozzák. jelentős esetek3 ,4.A Culex, az Anopheles és az Aedes a három szúnyognemzetség, amelyek leggyakrabban kapcsolódnak a betegségek átviteléhez5.A dengue-láz, az Aedes aegypti szúnyog által terjesztett fertőzés előfordulása az elmúlt évtizedben nőtt, és jelentős közegészségügyi fenyegetést jelent4,7,8.Az Egészségügyi Világszervezet (WHO) adatai szerint a világ lakosságának több mint 40%-át fenyegeti a dengue-láz, és évente 50–100 millió új eset fordul elő több mint 100 országban9,10,11.A dengue-láz jelentős közegészségügyi problémává vált, mivel előfordulása világszerte megnövekedett12,13,14.Az Anopheles gambiae, közismert nevén az afrikai Anopheles szúnyog, a trópusi és szubtrópusi régiókban előforduló emberi malária legfontosabb hordozója15.A nyugat-nílusi vírust, a St. Louis agyvelőgyulladást, a japán agyvelőgyulladást, valamint a lovak és madarak vírusos fertőzéseit a Culex szúnyogok terjesztik, amelyeket gyakran közönséges háziszúnyogoknak neveznek.Emellett bakteriális és parazita betegségek hordozói is16.Több mint 3000 termeszfaj él a világon, és több mint 150 millió éve léteznek17.A legtöbb kártevő a talajban él, és cellulózt tartalmazó fával és fatermékekkel táplálkozik.Az indiai termeszek, az Odontotermes obesus fontos kártevő, amely súlyos károkat okoz fontos haszonnövényekben és ültetvényfákban18.A mezőgazdasági területeken a termeszfertőzések különböző szakaszaiban óriási gazdasági károkat okozhatnak a különböző terményekben, fafajokban és építőanyagokban.A termeszek emberi egészségi problémákat is okozhatnak19.
A mikroorganizmusokkal és kártevőkkel szembeni rezisztencia kérdése a mai gyógyszerészeti és mezőgazdasági területeken összetett20,21.Ezért mindkét vállalatnak új, költséghatékony antimikrobiális és biztonságos biopeszticideket kell keresnie.Már kaphatók szintetikus peszticidek, amelyekről kimutatták, hogy fertőzőek, és elriasztják a nem célzott jótékony rovarokat22.Az elmúlt években a biofelületaktív anyagokkal kapcsolatos kutatások bővültek a különféle iparágakban történő alkalmazásuk miatt.A biofelületaktív anyagok nagyon hasznosak és létfontosságúak a mezőgazdaságban, a talajmentesítésben, a kőolaj kitermelésében, a baktériumok és rovarok eltávolításában, valamint az élelmiszer-feldolgozásban23,24.A biosurfaktánsok vagy mikrobiális felületaktív anyagok olyan biofelületaktív vegyszerek, amelyeket mikroorganizmusok, például baktériumok, élesztők és gombák termelnek part menti élőhelyeken és olajjal szennyezett területeken25,26.A kémiai eredetű felületaktív anyagok és a biofelületaktív anyagok két típusa, amelyeket közvetlenül a természetes környezetből nyernek27.Különféle biofelületaktív anyagokat nyernek tengeri élőhelyekről28,29.Ezért a tudósok új technológiákat keresnek a természetes baktériumokon alapuló biofelületaktív anyagok előállításához30,31.Az ilyen kutatások előrehaladása bizonyítja e biológiai vegyületek fontosságát a környezetvédelemben32.A Bacillus, Pseudomonas, Rhodococcus, Alcaligenes, Corynebacterium és ezek a baktériumnemzetségek jól tanulmányozott képviselői23,33.
A biofelületaktív anyagoknak számos típusa létezik, amelyek széles körben alkalmazhatók34.Ezeknek a vegyületeknek jelentős előnye, hogy némelyikük antibakteriális, lárvaölő és inszekticid hatással is rendelkezik.Ez azt jelenti, hogy a mezőgazdaságban, vegyiparban, gyógyszeriparban és kozmetikai iparban használhatók35,36,37,38.Mivel a biosurfaktánsok általában biológiailag lebomlanak és a környezet szempontjából előnyösek, integrált növényvédelmi programokban használják a növények védelmére39.Így alapvető ismereteket szereztünk az Enterobacter cloacae SJ2 által termelt mikrobiális biosurfaktánsok lárvicid és termeszellenes hatásáról.Megvizsgáltuk a mortalitást és a szövettani változásokat különböző koncentrációjú ramnolipid biosurfaktánsok hatására.Ezenkívül értékeltük a széles körben használt kvantitatív szerkezetaktivitás (QSAR) számítógépes programot, az Ecological Structure-Activity (ECOSAR) mikroalgák, daphniák és halak akut toxicitását.
Ebben a vizsgálatban a tisztított biofelületaktív anyagok termeszellenes aktivitását (toxicitását) különböző, 30 és 50 mg/ml közötti koncentrációkban (5 mg/ml-es időközönként) indiai termeszek, O. obesus és negyedik faj ellen tesztelték.A Cx instar lárvái.A quinquefasciatus szúnyoglárvái.Biosurfactant LC50 koncentrációja 48 órán keresztül O. obesus és Cx ellen.C. solanacearum.A szúnyoglárvákat nemlineáris regressziós görbe illesztési módszerrel azonosítottuk.Az eredmények azt mutatták, hogy a termeszek mortalitása nőtt a biosurfactant koncentráció növekedésével.Az eredmények azt mutatták, hogy a biosurfaktáns lárvicid (1. ábra) és termeszellenes aktivitással (2. ábra) rendelkezik, a 48 órás LC50-értékek (95% CI) 26,49 mg/l (25,40-27,57) és 33,43 mg/l. l (31,09-35,68 ábra), illetve (1. táblázat).Az akut toxicitás (48 óra) tekintetében a biosurfaktant a vizsgált szervezetekre „ártalmas” kategóriába sorolták.Az ebben a vizsgálatban előállított biofelületaktív anyag kiváló larvicid aktivitást mutatott, 100%-os mortalitás mellett az expozíciót követő 24-48 órán belül.
Számítsa ki a larvicid aktivitás LC50 értékét.Nemlineáris regressziós görbe illesztése (folytonos vonal) és 95%-os konfidencia intervallum (árnyékolt terület) a relatív mortalitáshoz (%).
Számítsa ki a termeszek elleni aktivitás LC50 értékét.Nemlineáris regressziós görbe illesztése (folytonos vonal) és 95%-os konfidencia intervallum (árnyékolt terület) a relatív mortalitáshoz (%).
A kísérlet végén morfológiai változásokat és anomáliákat figyeltünk meg mikroszkóp alatt.Morfológiai változásokat figyeltünk meg a kontroll és a kezelt csoportban 40-szeres nagyításnál.A 3. ábrán látható módon a biosurfaktánsokkal kezelt lárvák többségénél növekedési zavar jelentkezett.A 3a. ábra egy normál Cx-et mutat.quinquefasciatus, a 3b. ábra rendellenes Cx-et mutat.Öt fonálféreg lárvát okoz.
A biosurfaktánsok szubletális (LC50) dózisainak hatása a Culex quinquefasciatus lárvák fejlődésére.Fénymikroszkópos kép (a) normál Cx-ről 40-szeres nagyítással.quinquefasciatus (b) Rendellenes Cx.Öt fonálféreg lárvát okoz.
Jelen tanulmányban a kezelt lárvák (4. ábra) és termeszek (5. ábra) szövettani vizsgálata számos rendellenességet tárt fel, beleértve a hasi terület csökkenését, valamint az izmok, a hámrétegek és a bőr károsodását.középbél.A szövettan feltárta a vizsgálatban használt biosurfaktáns gátló hatásának mechanizmusát.
Normál, kezeletlen 4. stádiumú Cx lárvák kórszövettana.quinquefasciatus lárvák (kontroll: (a, b)) és biosurfaktánssal kezelték (kezelés: (c, d)).A nyilak a kezelt bélhámot (epi), a sejtmagokat (n) és az izmokat (mu) jelzik.Rúd = 50 µm.
Normál kezeletlen O. obesus (kontroll: (a, b)) és biosurfaktantással kezelt (kezelés: (c, d)) kórszövettana.A nyilak a bélhámot (epi) és az izmot (mu) jelzik.Rúd = 50 µm.
Ebben a tanulmányban az ECOSAR-t használták a ramnolipid biosurfaktáns termékek akut toxicitásának előrejelzésére az elsődleges termelőkre (zöld algák), az elsődleges fogyasztókra (vízibolhák) és a másodlagos fogyasztókra (halak).Ez a program kifinomult kvantitatív szerkezet-aktivitás vegyületmodelleket használ a toxicitás molekuláris szerkezet alapján történő értékelésére.A modell szerkezetaktivitás (SAR) szoftvert használ az anyagok vízi fajokra gyakorolt akut és hosszú távú toxicitásának kiszámításához.Pontosabban, a 2. táblázat összefoglalja a becsült átlagos halálos koncentrációkat (LC50) és az átlagos hatékony koncentrációkat (EC50) több faj esetében.A feltételezett toxicitást négy szintbe sorolták a vegyi anyagok osztályozásának és címkézésének globálisan harmonizált rendszere alapján (3. táblázat).
A vektorok által terjesztett betegségek, különösen a szúnyogtörzsek és az Aedes szúnyogok elleni védekezés.Egyiptomiak, most nehéz munka 40,41,42,43,44,45,46.Bár egyes kémiailag hozzáférhető peszticidek, például a piretroidok és a szerves foszfátok némileg előnyösek, jelentős kockázatot jelentenek az emberi egészségre, beleértve a cukorbetegséget, a szaporodási rendellenességeket, a neurológiai rendellenességeket, a rákot és a légúti betegségeket.Ráadásul idővel ezek a rovarok ellenállóvá válhatnak velük szemben13,43,48.Így a hatékony és környezetbarát biológiai védekezés a szúnyoggyérítés egyre népszerűbb módszerévé válik49,50.Benelli51 azt javasolta, hogy a szúnyogvektorok korai védekezése hatékonyabb lenne városi területeken, de nem javasolták a lárvaölők alkalmazását vidéki területeken52.Tom és munkatársai 53 azt is javasolták, hogy a szúnyogok éretlen stádiumában történő leküzdése biztonságos és egyszerű stratégia lenne, mivel érzékenyebbek a védekező szerekkel szemben54.
Egy erős törzs (Enterobacter cloacae SJ2) biosurfaktáns termelése következetes és ígéretes hatékonyságot mutatott.Korábbi tanulmányunk arról számolt be, hogy az Enterobacter cloacae SJ2 fizikai-kémiai paraméterek segítségével optimalizálja a biosurfactant termelését26.Tanulmányuk szerint a potenciális E. cloacae izolátum biofelületaktív anyag termelésének optimális feltételei a 36 órás inkubálás, 150 fordulat/perc sebességű keverés, pH 7,5, 37 °C, sótartalom 1 ppt, 2% glükóz szénforrásként, 1% élesztő .az extraktumot nitrogénforrásként használták fel 2,61 g/l biofelületaktív anyag előállítására.Ezenkívül a biofelületaktív anyagokat TLC, FTIR és MALDI-TOF-MS segítségével jellemeztük.Ez megerősítette, hogy a ramnolipid biofelületaktív anyag.A glikolipid biofelületaktív anyagok az egyéb típusú biofelületaktív anyagok legintenzívebben tanulmányozott osztályai55.Szénhidrát- és lipidrészekből, főleg zsírsavláncokból állnak.A glikolipidek közül a fő képviselők a ramnolipid és a szoforolipid56.A ramnolipidek két ramnózrészt tartalmaznak, amelyek mono- vagy di-β-hidroxi-dekánsavhoz kapcsolódnak 57 .A ramnolipidek alkalmazása az orvosi és gyógyszeriparban jól bevált 58, a közelmúltban peszticidként való felhasználásuk mellett 59 .
A biosurfaktáns kölcsönhatása a légzőszifon hidrofób régiójával lehetővé teszi, hogy a víz áthaladjon a sztóma üregén, ezáltal növelve a lárvák érintkezését a vízi környezettel.A biosurfaktánsok jelenléte a légcsőre is hatással van, amelynek hossza közel van a felszínhez, így a lárvák könnyebben felkúsznak a felszínre és lélegeznek.Ennek eredményeként a víz felületi feszültsége csökken.Mivel a lárvák nem tudnak megtapadni a víz felszínén, a tartály aljára esnek, ami megzavarja a hidrosztatikus nyomást, ami túlzott energiafelhasználást és fulladás okozta halált eredményez38,60.Hasonló eredményeket ért el a Ghribi61, ahol a Bacillus subtilis által termelt biosurfaktáns lárvaölő aktivitást mutatott az Ephestia kuehniella ellen.Hasonlóképpen, a Cx larvicid aktivitása.Das és Mukherjee23 szintén értékelte a ciklikus lipopeptidek hatását a quinquefasciatus lárváira.
A tanulmány eredményei a ramnolipid biosurfaktánsok Cx elleni lárvicid aktivitására vonatkoznak.A quinquefasciatus szúnyogok elpusztítása összhangban van a korábban publikált eredményekkel.Például a Bacillus nemzetségbe tartozó különféle baktériumok által termelt surfactin alapú biofelületaktív anyagokat használnak.és Pseudomonas spp.Egyes korai jelentések64, 65, 66 a Bacillus subtilis-ből származó lipopeptid biosurfaktánsok lárvaölő hatásáról számoltak be23.Deepali et al.63 azt találta, hogy a Stenotropomonas maltophiliából izolált ramnolipid biosurfaktáns 10 mg/l koncentrációban erős larvicid hatással rendelkezik.Silva et al.67 a ramnolipid biosurfaktáns Ae elleni lárvicid hatásáról számolt be 1 g/l koncentrációban.Aedes aegypti.Kanakdande et al.68 arról számolt be, hogy a Bacillus subtilis által termelt lipopeptid biosurfaktánsok általános mortalitást okoztak a Culex lárvákban és az eukaliptusz lipofil frakciójával rendelkező termeszekben.Hasonlóan, Masendra et al.69 munkahangya (Cryptotermes cynocephalus Light.) mortalitása 61,7% volt az E. nyers kivonat lipofil n-hexán és EtOAc frakcióiban.
Parthipan és munkatársai 70 beszámoltak a Bacillus subtilis A1 és a Pseudomonas stutzeri NA3 által termelt lipopeptid biofelületaktív anyagok inszekticid alkalmazásáról az Anopheles Stephensi, a Plasmodium maláriaparazita vektora ellen.Megfigyelték, hogy a lárvák és bábok hosszabb ideig éltek túl, rövidebb volt a peteérési periódusuk, sterilek voltak, és rövidebb élettartamúak, ha különböző koncentrációjú biofelületaktív anyagokkal kezelték őket.A B. subtilis A1 biosurfaktáns megfigyelt LC50 értéke 3,58, 4,92, 5,37, 7,10 és 7,99 mg/l volt a különböző lárvaállapotok (azaz I., II., III., IV. lárvák és stádiumú bábok) esetén.Összehasonlításképpen, a Pseudomonas stutzeri NA3 lárva I-IV. és bábstádiumában a biofelületaktív anyagok 2,61, 3,68, 4,48, 5,55 és 6,99 mg/l voltak.A túlélő lárvák és bábok megkésett fenológiája feltehetően a rovarirtó kezelések által okozott jelentős fiziológiai és anyagcserezavarok eredménye71.
A Wickerhamomyces anomalus CCMA 0358 törzs olyan biofelületaktív anyagot állít elő, amely 100%-ban lárvicid hatással rendelkezik az Aedes szúnyogok ellen.aegypti 24 órás intervallum 38 magasabb volt, mint Silva et al.A Pseudomonas aeruginosa-ból napraforgóolajat szénforrásként előállított biofelületaktív anyagról kimutatták, hogy 48 órán belül a lárvák 100%-át elpusztítja67.Abinaya és mtsai.72 és Pradhan és mtsai.73. a Bacillus nemzetség számos izolátuma által termelt felületaktív anyagok lárvicid vagy inszekticid hatását is kimutatták.Senthil-Nathan és munkatársai egy korábban publikált tanulmánya.megállapították, hogy a növényi lagúnáknak kitett szúnyoglárvák 100%-a valószínűleg elpusztul.74.
Az inszekticidek rovarbiológiára gyakorolt szubletális hatásának felmérése kritikus fontosságú az integrált növényvédelmi programokban, mivel a szubletális dózisok/koncentrációk nem pusztítják el a rovarokat, de csökkenthetik a rovarpopulációkat a következő generációkban a biológiai jellemzők megzavarásával10.Siqueira és munkatársai 75 teljes larvicid aktivitást (100%-os mortalitás) figyeltek meg a ramnolipid biosurfaktáns (300 mg/ml) esetében, amikor különböző, 50-300 mg/ml-es koncentrációkban tesztelték.Az Aedes aegypti törzsek lárva állapota.Elemezték az elhullásig eltelt idő és a szubletális koncentrációk hatását a lárvák túlélésére és úszási aktivitására.Ezenkívül az úszás sebességének csökkenését figyelték meg 24–48 órás szubletális koncentrációjú biosurfactant (pl. 50 mg/ml és 100 mg/ml) után.Úgy gondolják, hogy az ígéretes szubletális szerepet játszó mérgek hatékonyabbak a kitett kártevők többszörös károsodásában76.
Eredményeink szövettani megfigyelései azt mutatják, hogy az Enterobacter cloacae SJ2 által termelt biosurfaktánsok jelentősen megváltoztatják a szúnyog (Cx. quinquefasciatus) és a termeszek (O. obesus) lárváinak szöveteit.Hasonló anomáliákat okoztak a bazsalikomolajból készült An.gambiaes.s és An.arabicát Ochola77 írta le.Kamaraj és mtsai.78 ugyanezeket a morfológiai rendellenességeket írták le az An.Stephanie lárváit arany nanorészecskéknek tették ki.Vasantha-Srinivasan és munkatársai79 arról is beszámoltak, hogy a pásztortáska illóolaja súlyosan károsította az Aedes albopictus kamráját és hámrétegét.Aedes aegypti.Raghavendran és munkatársai arról számoltak be, hogy a szúnyoglárvákat helyi Penicillium gomba 500 mg/ml-es micéliumkivonatával kezelték.Az Ae súlyos szövettani károsodást mutat.aegypti és Cx.Halálozási arány 80. Korábban Abinaya et al.Az An negyedik állapotú lárváit tanulmányozták.Stephensi és Ae.Aegypti számos szövettani változást talált a B. licheniformis exopoliszacharidokkal kezelt Aedes aegyptiben, ideértve a gyomor vakbélését, az izomsorvadást, az idegzsinór ganglionok károsodását és dezorganizációját72.Raghavendran és munkatársai szerint a P. daleae micéliumkivonattal végzett kezelést követően a vizsgált szúnyogok (4. lárvák) középső bélsejtjei a bél lumenének duzzadását, az intercelluláris tartalom csökkenését és magdegenerációt mutattak81.Az echinacea levélkivonattal kezelt szúnyoglárváknál ugyanezeket a szövettani változásokat figyeltük meg, jelezve a kezelt vegyületek inszekticid hatását50.
Az ECOSAR szoftver használata nemzetközi elismerésben részesült82.A jelenlegi kutatások azt sugallják, hogy az ECOSAR biofelületaktív anyagok mikroalgákkal (C. vulgaris), halakkal és vízibolhákkal (D. magna) szembeni akut toxicitása az Egyesült Nemzetek Szervezete által meghatározott „toxicitási” kategóriába tartozik83.Az ECOSAR ökotoxicitási modellje a SAR-t és a QSAR-t használja az anyagok akut és hosszú távú toxicitásának előrejelzésére, és gyakran használják a szerves szennyező anyagok toxicitásának előrejelzésére82,84.
A paraformaldehidet, a nátrium-foszfát puffert (pH 7,4) és az összes többi, ebben a vizsgálatban használt vegyszert az indiai HiMedia Laboratories cégtől vásároltuk.
A biosurfaktáns előállítását 500 ml-es Erlenmeyer-lombikban végeztük, amelyek 200 ml steril Bushnell Haas táptalajt tartalmaztak, amelyet egyedüli szénforrásként 1% nyersolajjal egészítettek ki.Enterobacter cloacae SJ2 előtenyészetét (1,4 × 104 CFU/ml) beoltottuk és orbitális rázógépen tenyésztettük 37 °C-on, 200 fordulat/perc sebességgel 7 napon keresztül.Az inkubációs periódus után a biofelületaktív anyagot a táptalaj 3400 x g-vel 20 percig 4 °C-on történő centrifugálásával extraháltuk, és a kapott felülúszót szűrési célokra használtuk fel.A biosurfaktánsok optimalizálási eljárásait és jellemzését korábbi tanulmányunkból26 vettük át.
A Culex quinquefasciatus lárvákat a Tengerbiológiai Fejlett Tanulmányok Központjától (CAS), Palanchipetai, Tamil Nadu (India) szereztük be.A lárvákat ionmentesített vízzel töltött műanyag edényekben tenyésztjük 27 ± 2 °C-on és 12:12 (világos:sötét) fényperiódus mellett.A szúnyoglárvákat 10%-os glükózoldattal etettük.
Culex quinquefasciatus lárvákat találtak nyitott és nem védett szeptikus tartályokban.Használja a szabványos osztályozási irányelveket a lárvák laboratóriumi azonosítására és tenyésztésére85.A larvicidális kísérleteket az Egészségügyi Világszervezet ajánlásaival összhangban végezték 86 .SH.A quinquefasciatus negyedik állapotú lárváit zárt csövekbe gyűjtöttük 25 ml-es és 50 ml-es csoportokban, kapacitásuk kétharmadának megfelelő légréssel.Biosurfactant (0-50 mg/ml) minden csőbe külön-külön adtuk, és 25 °C-on tároltuk.A kontrollcső csak desztillált vizet (50 ml) használt.Elpusztult lárváknak tekintettük azokat, amelyek a lappangási idő alatt (12–48 óra) nem mutattak úszás jeleit87.Számítsa ki a lárvapusztulás százalékát az egyenlet segítségével!(1)88.
Az Odontotermitidae családba tartozik az Odontotermes obesus indiai termesz, amelyet a mezőgazdasági egyetemen (Annamalai Egyetem, India) rothadó rönkökben találtak.Tesztelje ezt a biosurfactant (0–50 mg/ml) normál eljárásokkal annak megállapítására, hogy káros-e.30 perces lamináris légáramban történő szárítás után minden Whatman papírcsíkot 30, 40 vagy 50 mg/ml koncentrációjú biofelületaktív anyaggal vontunk be.Az előre bevont és bevonat nélküli papírcsíkokat egy Petri-csésze közepén tesztelték és hasonlították össze.Minden Petri-csésze körülbelül harminc aktív termeszből, O. obesusból áll.A kontroll- és teszttermeszek nedves papírt kaptak táplálékforrásként.Az összes lemezt szobahőmérsékleten tartottuk az inkubációs időszak alatt.A termeszek 12, 24, 36 és 48 óra után pusztultak el89,90.Ezután az 1. egyenletet alkalmaztuk a termeszek mortalitás százalékos arányának becslésére különböző biofelületaktív anyagok koncentrációi mellett.(2).
A mintákat jégen tartottuk, és 100 ml 0,1 M nátrium-foszfát puffert (pH 7,4) tartalmazó mikrocsövekbe csomagoltuk, majd elküldtük a Rajiv Gandhi Center for Aquaculture (RGCA) Központi Akvakultúra Patológiai Laboratóriumába (CAPL).Szövettani Laboratórium, Sirkali, Mayiladuthurai.kerület, Tamil Nadu, India további elemzésre.A mintákat azonnal 4%-os paraformaldehidben fixáltuk 37 °C-on 48 órán át.
A rögzítési fázis után az anyagot háromszor mostuk 0,1 M nátrium-foszfát pufferrel (pH 7,4), fokozatosan dehidratáltuk etanolban, és LEICA gyantába áztattuk 7 napig.Ezután az anyagot egy gyantával és polimerizálóval töltött műanyag formába helyezik, majd 37 °C-ra melegített kemencébe helyezik, amíg az anyagot tartalmazó blokk teljesen polimerizálódik.
A polimerizáció után a blokkokat LEICA RM2235 mikrotom segítségével (Rankin Biomedical Corporation 10 399 Enterprise Dr. Davisburg, MI 48 350, USA) 3 mm vastagságúra vágtuk.A szakaszok diákonként vannak csoportosítva, diánként hat rész van.A lemezeket szobahőmérsékleten szárítottuk, majd hematoxilinnal festettük 7 percig, és folyó vízzel mostuk 4 percig.Ezenkívül vigye fel az eozin oldatot a bőrre 5 percig, és öblítse le folyó vízzel 5 percig.
Az akut toxicitást különböző trópusi szintekről származó vízi organizmusok segítségével jelezték előre: 96 órás hal LC50, 48 órás D. magna LC50 és 96 órás zöldalgák EC50.A ramnolipid biofelületaktív anyagok halakra és zöld algákra gyakorolt toxicitását az Egyesült Államok Környezetvédelmi Ügynöksége által kifejlesztett ECOSAR 2.2 for Windows szoftverrel értékelték.(Elérhető online: https://www.epa.gov/tsca-screening-tools/ecological-struct-activity-relationships-ecosar-predictive-model).
A lárvicid és az antitermesz-aktivitás minden vizsgálatát három párhuzamosban végeztük el.A lárva- és termeszpusztulási adatok nemlineáris regresszióját (a dózis-válasz változók logóját) 95%-os konfidencia intervallum melletti medián halálos koncentráció (LC50) kiszámításához végeztük, és a koncentráció-válasz görbéket a Prism® (8.0-s verzió, GraphPad Software) Inc. segítségével állítottuk elő. USA) 84, 91.
A jelen tanulmány feltárja az Enterobacter cloacae SJ2 által termelt mikrobiális biofelületaktív anyagok lehetőségét szúnyoglárvics és termeszellenes szerekként, és ez a munka hozzájárul a lárvicid és termeszellenes hatás mechanizmusainak jobb megértéséhez.A biosurfaktánsokkal kezelt lárvák szövettani vizsgálatai az emésztőrendszer, a középbél, az agykéreg károsodását és a bélhámsejtek hiperpláziáját mutatták ki.Eredmények: Az Enterobacter cloacae SJ2 által termelt ramnolipid biofelületaktív anyag termeszellenes és lárvicid aktivitásának toxikológiai értékelése kimutatta, hogy ez az izolátum potenciális biopeszticid a szúnyogok (Cx quinquefasciatus) és termeszek (O. obesus) vektor által terjesztett betegségeinek leküzdésére.Meg kell érteni a biosurfaktánsok mögöttes környezeti toxicitást és lehetséges környezeti hatásaikat.Ez a tanulmány tudományos alapot nyújt a biofelületaktív anyagok környezeti kockázatának felméréséhez.
Feladás időpontja: 2024.09.09